引言
有著香料皇后之稱的香草，是全球最受歡迎的香料之一，它被廣泛運用在甜點、飲料，甚至是香水及沐浴保養用品等。經過熟成催化的香草莢含有多達200種的香氣成分，而當中的香草醛(Vanillin) 具有令人愉悅的香甜氣味，也是香草莢主要的氣味來源。
香草從種植、栽培到加工成香草莢的製程，以及香草醛的檢測方式，都有其國家(或國際)標準。根據檢測標準，香草莢也將分成不同的等級並應用於不同的產品。本文主要介紹如何利用表面增強拉曼光譜(SERS)技術快速篩檢香草醛(Vanillin)的成份。
一、測試香草莢之萃取液
A. 量測流程與結果
1. 取2克香莢蘭樣品(截成6-8段)，放入50ml離心管
2. 加入20ml純水，用手搖晃30秒
2. 加入20ml純水，用手搖晃30秒
3. 取1ml萃取液，加入1ml甲醇混合均勻
4. 以50%甲醇水溶液沖洗淨化管(PT-001)，取1ml混合液以每秒一滴通過管柱(去除色素)
4. 以50%甲醇水溶液沖洗淨化管(PT-001)，取1ml混合液以每秒一滴通過管柱(去除色素)
5. 取4.5μl滴至SERS晶片，使用RMS1000-AUTO 進行自動化光譜量測
量測光譜：
B. 注意事項與小結
1. 不同型態之樣品，可調整其前處理萃取方式，然而需注意樣品基質之干擾問題。
2. 拉曼光譜主要應用定位為快速篩檢，無法精確量測出含量。如能連結光譜與香草醛含量之關係，將可快速進行半定量檢測或定義濃度區間。
二、香草醛標準品半定量測試 (2021/03/29 updated)
A. 量測流程與結果
1.測試標準品
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Vanillin EP香草醛 (試藥級)
製造廠：Scharlau
CAS 121-33-5
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以 50%(v/v)甲醇水溶液分別配製濃度如下：
0.01 ppm /0.2 ppm /1 ppm /5ppm /15 ppm
3.半定量參考線(以特徵峰位置1262來計算)
4. 量測光譜
- 15ppm
- 5ppm
- 1ppm
- 0.2ppm
B. 說明與小結
1. 利用香草醛標準品，可建立半定量之類檢量線。
2. 標準品與作物萃取後拉曼特徵峰一致。
3. 若測試實際樣品，需加入回收率值來進行反推; 若是採用表面萃取，則回收率將依不同型態而改變(如種子、豆子等，需進行各作物回收率測試)。
4. 本方法為快篩方法，並非精確定量工具，可快速對作物之有效成份進行半定量判別。
5. 半定量之準確度，將隨資料庫之累積而上升。
6. 本方法可利用表面萃取，不需淨化程序，以直接稀釋後來得到量化關係。
6. 本方法可利用表面萃取，不需淨化程序，以直接稀釋後來得到量化關係。
檢測設備：RMS1000-AUTO 785自動化拉曼光譜系統
